Аллергия     |     Аллергическая альтерация нейтрофилов

Аллергические реакции клеток

В настоящее время накоплен значительный экспериментальный материал, показывающий различные изменения структуры ш функции клеток сенсибилизированных животных под влиянием воздействия на них специфического аллергена. Работы, выполненные в этом плане, представлены исследованиями, в которых специфический аллерген в виде разрешающего воздействия поражал изолированные клетки крови (эритроциты, лейкоциты, кровяные пластинки), клетки тканевых культур, или, наконец, клетки изолированных органов (гладкомышечные органы, нервные узлы). К этой же группе исследований примыкают работы, в которых изучались изменения функций клеток отдельных органов и тканей в целом организме. Это — большая группа работ по изучению аллергических реакций различных органов (печени, почек, желудочно-кишечного-тракта), покровного эпителия кожи, слизистых оболочек или клеточных элементов мезенхимального происхождения. Обзор этих работ см. у А. Д. Адо (1970).

Аллергическая альтерация лейкоцитов

В настоящее время известны различные методические-приемы изучения аллергической альтерации лейкоцитов крови. В зависимости от вида изучаемого аллергена (пыльца растений, домашняя пыль, туберкулин и др.) применяли различные методы исследования повреждающего действия аллергенов на лейкоциты. Многие из предложенных методов используют в клинической практике с целью диагностики аллергических заболеваний у людей.

Так, для изучения лизиса лейкоцитов пользовались методом их подсчета в камере (Berkowitz et al., 1950; Pettit et al., 1961, и др.); определяли активность клеток при наблюдении в фазовоконтрастном микроскопе^ (Black, 1956); выявляли количество поврежденных клеток с помощью различных красителей: нейтрального красного (Audia, Noacli, 1961; Shelley, 1962; С. М. Титова, 1967, 1971; А. А. Польнер, 1968; Т. И. Серова, 1973), трепанового синего (Т. М. Царегородцева, 1966), акридинового оранжевого (П. П. Сахаров, Г. А. Кудрина, 1964; Н. В. Медуницын, В. Б. Герва-зиева, 1967; В. Б. Гервазиева, 1968). Определяют также содержание гиста-мина, освобожденного лейкоцитами (Lichtenstein et al., 1974); учитывают лейкоагглютинацию (В. Б. Гервазиева, 1968; Augustin, 1964), торможение миграции макрофагов (А. А. Польнер, Т. И. Серова, 1974; Heilman ©t al, 1967) и используют другие методы изучения повреждения клеток.

Аллергическая альтерация лейкоцитов наблюдается как в реакциях немедленного типа, так и при замедленной гиперчувствителыюсти (В. А. Фрадкин, 1962).

С. М. Титова (1967), И. В. Медуницын и В. Б. Гервазиева (1967) в нашей лаборатории изучали аллергическую альтерацию лейкоцитов у больных поллииозами.

В работе С. М. Титовой был использован метод прижизненной окраски лейкоцитов нейтральным красным. Поврежденными считались клетки, в которых окрашены ядро, вся клетка, зернистость, расположенная в одной половине или по всей клетке. Такие клетки были неподвижны или с заторможенным движением. Исследования проведены в течение трех пыльцевых сезонов (1965, 1966, 1967) на 10 здоровых лицах и 65 нелеченых больных поллинозом. с аллергией к пыльце злаковых трав. Испытуемые были обследованы до начала цветения, во время цветения и после окончания сезона цветения трав. Скарификациопные кожные пробы у всех больных были положительными на специфические аллергены (из пыльцы тимофеевки и овсяницы) и отрицательными па псспецифический аллерген (из пыльцы ясеня).

По мере нарастания симптомов поллиноза снижалась резистентность лейкоцитов к воздействию забуференного физиологического раствора (контроль). Так, у больных, обследованных перед началом сезона цветения трав и не имевших клинических симптомов поллиноза, процент окрашенных лейкоцитов через 3 мин после их контакта с контрольным раствором в среднем составил 5,7 ±0,65. У больных, которые были обследованы в сезон цветения и имели клинические проявления поллиноза, этот процент был равен 14,7±1,37; у больных без клинических симптомов этого заболевания (после сезона цветения трав) он составил 4,6 ±0,84, у здоровых — 3. По мере нарастания симптомов поллиноза повышался процент окрашенных лейкоцитов при воздействии как специфических, так и неспецифических аллергенов. При этом через 3 мин контакта с контрольным раствором и аллергенами результаты были следующими: в контроле — 14,7 ±1,37%, с аллергенами: тимофеевки— 13,7± 1,28%, овсяницы— 13,2±1,57%, ясеня— 11,9± 1,45%. Через 3—4 ч наблюдалась статистически достоверная разница (р<0,001) между результатами реакции в контроле и со специфическим аллергеном (соответственно 12,6±1,32 и 24,0±2,80%). Реакция на иеспецифический аллерген по сравнению с контролем не имела достоверного различия (13,3±1,22 и 17,1±1,84%). Наиболее четко разница между результатами в контроле и со специфическим аллергеном проявляется у больных с нерезко сниженной резистентностью лейкоцитов при наличии клинических симптомов болезни. Так, через 3 ч альтерация в контроле составляла 2,81 ±1,22%; со специфическим антигеном (тимофеевка) — 11,6 ±1,06%. Аллергическая альтерация лейкоцитов после контакта со специфическими аллергенами наблюдается еще у больных со слабыми симптомами поллиноза и отсутствует у больных без клинических проявлений.

Таким образом, альтерация лейкоцитов связана с клиническими симптомами поллиноза, при наличии которых снижается резистентность лейкоцитов. Аллергическая альтерация лейкоцитов больных поллинозом носит специфический характер.

В работе Н. В. Медуницына и В. Б. Гервазиевой был использован метод флюоресценции (окраска акридиновым оранжевым), который позволяет работать с цельной кровью и наблюдать более тонкие морфологические изменения в лейкоцитах. Последние дифференцированно окрашиваются акридиновым оранжевым и ярко флюоресцируют в черном поле зрения. Эритроциты же не флюоресцируют из-за присутствия гемоглобина, являющегося гасителем свечения.

В работе были использованы аллергены из пыльцы тимофеевки луговой (Phleum pratense), ольхи серой (Alrms incana), амброзии полыннолистной (Ambrosia artemisiifolia) и дуба (Quercus robur), приготовленные по общепринятой методике на экстрагирующей жидкости Кока в НИИЛ АМН СССР. Кровь брали у больных поллинозами.

В норме ядра лейкоцитов, окрашенные акридином оранжевым, ярко-зеленые, цитоплазма тускло-зеленая, гранулы в протоплазме кирпичнокрасные.

Подобное свечение наблюдали в контрольных препаратах. Оно объясняется способностью акридина оранжевого избирательно взаимодействовать с нуклеиновыми кислотами. Так, РНК цитоплазматических гранул связывает большое количество красителя и дает комплексы оранжево-красного свечения. ДНК связывает краситель в меньшей степени и дает ярко-зеленое свечение. Слабое свечение цитоплазмы обусловлено, очевидно, тем, что внеядерная РНК находится в связанном состоянии с другими компонентами клетки и не имеет свободных связей для реакции с красителем (рис. 50, а).

В опытных препаратах наблюдались лейкоциты, утратившие нормальную круглую форму, с неровными бахромчатыми краями. К этим измененным клеткам были также отнесены клетки без видимой структуры ядра, с явлениями вакуолизации, полным или частичным исчезновением цитоплазматических гранул (рис. 50, б). Было обнаружено, что в среднем процент альтерированных лейкоцитов нелеченых больных, чувствительных к пыльце тимофеевки, равен 69, к пыльце ольхи — 62 и к пыльце амброзии — 72.

После специфической десенсибилизирующей терапии он был соответственно равен 58, 57 и 44 по сравнению с действием неспецифического аллергена (экстракта пыльцы дуба) на лейкоциты больных, дающего только 7 % разрушенных клеток.

В. В. Гервазиева (1968) также показала, что в присутствии аллергена подвергаются альтерации лейкоциты здоровых доноров, пассивно сенсибилизированные in vitro сыворотками крови больных поллипозами (в среднем 75 % разрушенных клеток при действии специфического аллергена по сравнению с контролем, равным 5%). Вместе с тем отмытые от сыворотки лейкоциты больных в присутствии соответствующего аллергена дали незначительный процент альтерации, приближающийся к коптролю (8). Добавление же к иммунной системе сыворотки больных, содержащей кож-ио-сепсибилизирующие антитела (реагины), увеличивало реакцию лейкоцитов до 53 %.

Эти данные подтверждают, что в механизме аллергической альтерации лейкоцитов существенную роль играют гуморальные факторы. Взаимодействие аллергена с антителом на поверхности клетки или очень близко от нее активно вовлекает лейкоциты вследствие их функциональных особенностей в процесс инактивации иммунного комплекса путем поглощения последнего и внутриклеточного его переваривания. В ходе этого взаимодействия лейкоциты подвергаются как морфологической, так и энзимати-ческой альтерации и, наконец, сами становятся жертвой литического действия освободившихся ферментов. Так, альтерация лейкоцитов под действием иммунного комплекса завершается лейкоцитолизом.

Реакцию лейкоцитолиза изучали па морских свинках, сенсибилизированных аллергеном из пыльцы тимофеевки со стимулятором Фрейида. В ранние сроки сенсибилизации (5—6 сут) процент лейкоцитолиза не отличался от контроля. На 7—10-й день сенсибилизации процент клеток, погибших после кратковременного контакта с аллергеном тимофеевки, в 3 раза превышал контроль, после контакта в течение 1ч — в 4 раза, в течение 21 ч — в 5 раз.

Лейкоцитолиз был явно выражен до 30-го дня от начала сенсибилизации.

Согласно данным некоторых авторов (Ф. Ф. Лукманова, 1964, и др.), обращает па себя внимание тот факт, что цитотоксическое действие аллергена тимофеевки остается, когда ее цветение в природе уже закончено, но цветут другие травы (пырей), имеющие общие антигенные свойства с тимофеевкой. Положение о том, что лейкоциты могут специфически реагировать со сходными в антигенном отношении аллергенами, требует дальнейшего изучения.

Интернет-магазин детского трикотажа.