Пассивная сенсибилизация
Уже в самых первых работах по анафилаксии были использованы приемы пассивной сенсибилизации от одного животного к другому (Г. П. Сахаров, 1905; Besredka, Steinhart, 1907, и др.). Сущность метода пассивной анафилаксии, как и пассивного иммунитета, заключается в передаче состояния сенсибилизации животному через антитела, находящиеся в сыворотке крови или других жидкостях (экссудат, моча и др.) сенсибилизированного организма.
Пассивная анафилаксия лучше всего воспроизводится у морских свинок. У пих удается как гомологическая (от свинки к свинке), так и гетерологическая (например, сенсибилизация морской свинки сывороткой сенсибилизированного кролика) пассивная сенсибилизация. Последний вид сенсибилизации особенно удобен, так как кролик хорошо вырабатывает антитела, а свинка является весьма чувствительным к анафилаксии животным. Морскую свинку используют также для изучения состояния аллергии у человека, сенсибилизируя ее пассивно сывороткой больного с предполагаемым аллергическим заболеванием.
Количество сыворотки, вводимой морской свинке при пассивной сенсибилизации, значительно превышает таковое при активной. Необходимо вводить несколько миллилитров сыворотки. Сыворотку обычно вводят внутрибрюшинно или внутривенно, хотя возможно внутримышечное и подкожное введение сыворотки.
У человека пассивная сенсибилизация воспроизводится лишь в форме местной сенсибилизации. Наибольшее распространение у людей получил метод пассивной сенсибилизации по Прауснитцу — Кюстнеру и его модификации. Сущность этого метода заключается в том, что 0,1—0,3 мл сыворотки больного аллергическим заболеванием вводят виутрикожно здоровому человеку, а через сутки в это же место вводят тот аллерген, к которому предполагается повышенная чувствительность у исследуемого больного. В месте введения аллергена и сыворотки на коже здорового человека развивается аллергическая воспалительная реакция. Если же введенный аллерген не соответствует сыворотке, примененной для пассивной сенсибилизации, аллергической реакции на коже не возникает.
Vallery-Radot (1932) указывает на следующие условия воспроизведения пассивной передачи аллергического состояния от человека к человеку: 1) сыворотка для сепсибилизации может браться у больного, например у астматика, как во время приступа, так и вне его; 2) реакцию можно ставить как со свежей сывороткой, так и с сывороткой, простоявшей 24 ч после взятия. Стояние сыворотки более суток при комнатной температуре или нагревание ее до 56° С в течение получаса уменьшает сенсибилизирующие свойства сыворотки; 3) антиген должен быть обязательно белковым веществом; 4) для постановки реакции лучше всего использовать внутреннюю поверхность предплечья; 5) время между сенсибилизирующей ипъек-циой сыворотки и разрешающей инъекцией антигена должно быть не менее 45 мин и по более 48 ч.
Известны модификации реакции Прауснитца — Кюстнера. Так, в одно место кожи, например па предплечье одной руки, вводят сыворотку для сепсибилизации, а в другое, далеко отстоящее, место кожи, на симметричной стороне предплечья другой руки, вводят разрешающую дозу аллергена. По другой модификации данной реакции сенсибилизирующую дозу сыворотки вводят виутрикожно, а разрешающую дозу — внутримышечно. Аллергическая реакция развивается в месте внутрикожного сенсибилизирующего введения сыворотки.
В дальнейшем явления пассивной сенсибилизации и анафилаксии изучали более подробно с помощью количественных методов оценки пассивной сенсибилизации. В качестве аллергена использовали полисахариды капсулы пневмококка, кристаллический яичный альбумин, бычий глобулин и другие очищенные глобулины. Rabat и Landow (1942) подробно изучили взаимоотношение между количеством сенсибилизирующих свинку антител (в миллиграммах азота антител) и величиной разрешающей дозы антигена. Результаты их опытов представлены в табл. 43. Свинок сенсибилизировали 0,06 мг аптител (по азоту) кроличьей сыворотки против яичного альбумина.
Ряд важных факторов по вопросу о мехапизме сенсибилизации получили Нагрет с соавт. (1961). Показано, что время, необходимое для получения пассивной сенсибилизации изолированного гладкомышечпого органа (отрезок кишки морской свинки) одной и той же интенсивности: (измеренной по высоте анафилактической контрактуры), прямо пропорционально концентрации антител в среде, омывающей данный орган. Это соотношение выражается как C=f(t), где С — концентрация антител в среде и t — время инкубации органа в среде, содержащей антитела.
Важным условием, способствующим пассивной сенсибилизации, является присутствие электролитов в среде. Электролиты способствуют ионизации антител и поляризации поверхности клеток сенсибилизируемого органа. Эти процессы облегчают в свою очередь фиксацию антител па клетках органа. Влияние электролитов на пассивную сенсибилизацию но зависит от их химических свойств и определяется только концентрацией (ионизацией), вызываемой электролитом в среде. В среде, лишенной электролитов (изотонический раствор глюкозы), пассивная сенсибилизация происходит значительно медленнее и менее интенсивно. Невольно напрашивается апалогия этих результатов (Halpern) со старыми опытами И. Г. Савченко (1902), показавшего отсутствие процесса фагоцитоза в среде, лишенной электролитов.
Весьма интересно в практическом отношении наблюдение Halpern, что γ-глобулин человека, морской свинки или кролика подавляет пассивную сепсибилизацию изолированной кишки морской свинки;α- и β- глобулин, а также альбумин сыворотки крови указапных животных этим действием не обладают. Неактивен также γ-глобулин лошади. Эти наблюдения позволяют понять хорошо известный со времени Фридбергера факт, что длительное отмывание изолированного оргапа от крови (и γ глобулинов) значительно усиливает эффективность его пассивной сенсибилизации.